[1]张巧,林科雄,刘聚伟,等.轻型链球菌临床分离株psaA基因敲除株的构建及其毒力影响的初步研究[J].中华肺部疾病杂志,2013,(05):0.
点击复制
轻型链球菌临床分离株psaA基因敲除株的构建及其毒力影响的初步研究(PDF)
《中华肺部疾病杂志》[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]
- 卷:
-
- 期数:
-
2013年05期
- 页码:
-
0
- 栏目:
-
- 出版日期:
-
2013-11-05
文章信息/Info
- Title:
-
-
- 作者:
-
张巧; 林科雄; 刘聚伟; 李瑾; 王长征; 马千里; 刘进
-
- Author(s):
-
-
-
-
- 关键词:
-
肺炎链球菌表面蛋白A; 轻型链球菌; 基因敲除; 鼻咽部定植
- Keywords:
-
-
- 分类号:
-
-
- DOI:
-
-
- 摘要:
-
目的 构建轻型链球菌(S.mitis)临床分离株S.mitis008肺炎链球菌表面蛋白A(psaA)基因敲除菌株S.mitis00801,并检测其生长及毒力影响,为进一步分析轻型链球菌属细菌间psaA基因水平转移的功能学意义奠定基础。方法 采用长臂同源多聚酶链反应技术(LFH-PCR)构建含红霉素耐药基因(erm)片段及psaA基因上、下游同源序列的连接片段,并转化至S.mitis008中,在含红霉素的平板上筛选psaA基因敲除菌株,并采用PCR鉴定;进一步观察psaA基因敲除株S.mitis00801体外生长情况,并利用小鼠模型观察S.mitis008和S.mitis00801鼻咽部定植能力的差异。结果 PCR结果均证实轻型链球菌psaA基因敲除菌株S.mitis00801构建成功;S.mitis008和S.mitis00801体外生长情况比较无差异;在轻链球菌CBA/n小鼠鼻咽部定植模型中,psaA基因敲除菌株S.mitis00801定植能力较未敲除株S.mitis008明显减少,存在统计学差异(P<0.01)。结论 LFH-PCR技术构建psaA基因敲除菌株S.mitis00801方法切实可行,psaA基因的敲除对细菌的体外生长无影响,但降低了细菌在体内鼻咽部定植的能力。
- Abstract:
-
-
更新日期/Last Update:
2013-11-05