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[1]孙欢,杨俊俊,贺斌峰,等.野生型大鼠Rab5a基因表达载体pcDNA3-Rab5(a) WT的转化扩增及鉴定[J].中华肺部疾病杂志,2013,(06):0.
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野生型大鼠Rab5a基因表达载体pcDNA3-Rab5(a) WT的转化扩增及鉴定(PDF)

《中华肺部疾病杂志》[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]

卷:
期数:
2013年06期
页码:
0
栏目:
出版日期:
2013-12-26

文章信息/Info

Title:
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作者:
孙欢; 杨俊俊; 贺斌峰; 王关嵩
Author(s):
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关键词:
Rab5a; 质粒转化; 质粒扩增; DH5α感受态细胞
Keywords:
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分类号:
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DOI:
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摘要:
目的 对含野生型大鼠Rab5a基因载体pcDNA3-Rab5(a)WT进行体外转化、扩增及鉴定，为基于Rab5a的相关研究提供高纯度、高丰度的表达载体。 方法 取pcDNA3-Rab5(a)WT质粒转化DH 5α感受态菌，再接种到含氨苄青霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选，对挑取的阳性克隆进行LB液体培养基培养后抽提质粒，用超微量核酸蛋白测定仪测定提取质粒的纯度和浓度，并取样进行琼脂糖凝胶电泳及PCR鉴定。结果 经转化后获得了大量抗氨苄青霉素的阳性克隆菌落，挑取阳性克隆并经培养后提取的pcDNA3-Rab5(a)WT质粒均为浓度高、纯度高、超螺旋结构为主的质粒。pcDNA3 -Rab5(a)WT经PCR后得到Rab5a基因。结论 成功转化并扩增了pcDNA3-Rab5(a)WT，为Rab5的相关研究提供了高质量的表达载体。
Abstract:
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参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
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更新日期/Last Update: 1900-01-01