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[1]吕学军,陆卫忠,张永娟,等.筛选小鼠Cltb 启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建[J].中华肺部疾病杂志,2015,(01):0.
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筛选小鼠Cltb 启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库的构建(PDF)

《中华肺部疾病杂志》[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]

卷:
期数:
2015年01期
页码:
0
栏目:
出版日期:
2015-01-01

文章信息/Info

Title:
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作者:
吕学军; 陆卫忠; 张永娟; 郭亮; 李少莹; 李玉英; 钱桂生
Author(s):
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关键词:
Cltb基因; 酵母单杂交文库; 转录调控
Keywords:
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分类号:
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DOI:
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摘要:
目的 利用酵母单杂交系统筛选与Cltb基因启动子结合的顺式元件，获得调控Cltb基因表达的转录因子，阐明Cltb基因的转录调控机理。方法 首先，构建表达Cltb调控序列的诱饵质粒pBaitAbAi，并将诱饵质粒转入Y1HGold菌株，构建可稳定表达“诱饵报告子”的酵母菌株；然后，运用SMARTTM技术构建小鼠肺组织酵母单杂交cDNA AD融合表达文库，并进行cDNA文库的筛选。结果 成功构建了筛选Cltb启动子顺式元件结合蛋白的酵母单杂交文库，该文库的转化效率为：9.35×105 CFU/μg。通过对文库的筛选最后获得了5个阳性克隆并测序，得到5个可编码结合蛋白的基因，分别是Srrt、hnRNPs A/B、Irf1、NKx2.5和Zfp953。结论 所构建的酵母单杂交文库符合实验要求，筛选的5个转录因子为研究Cltb基因表达调控奠定了基础。
Abstract:
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参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:
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更新日期/Last Update: 1900-01-01