[1]郑珍容,贺斌峰,魏征华,等.脂多糖/脂多糖结合蛋白复合物的初步构建[J].中华肺部疾病杂志,2017,(02):0.
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《中华肺部疾病杂志》[ISSN:1006-6977/CN:61-1281/TN]
- 卷:
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- 期数:
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2017年02期
- 页码:
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0
- 栏目:
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- 出版日期:
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2017-04-28
文章信息/Info
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- 作者:
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郑珍容; 贺斌峰; 魏征华; 王关嵩; 戢福云; 徐智
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- Author(s):
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- 关键词:
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脂多糖; 脂多糖结合蛋白; 复合物; 构建
- Keywords:
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- 分类号:
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- DOI:
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目的 采用温孵法构建脂多糖/脂多糖结合蛋白(LPS/LBP)复合物,研究LPS炎症信号通路。方法 将LPS与LBP按 15︰1、10︰1、5︰1的比例混匀。把LPS/LBP混合物、LBP(浓度分别为200 μg/ml、100 μg/ml和50 μg/ml)、LPS(浓度分别为100 μg/ml、50 μg/ml)过夜孵育。将孵育后的LPS/LBP混合物、LBP、LPS行凝胶电泳,经考马斯亮蓝染色后将各染色条带切取,行蛋白回收,并测定内毒素。结果 凝胶电泳后,LPS/LBP复合物、LBP泳道于相对分子质量52×103处可见考马斯亮兰染色的条带。样本中LBP浓度越高、条带染色越浓,LPS泳道对应于相对分子质量52×103处无染色条带出现。各浓度比例的LPS/LBP复合物电泳后凝胶条带回收物中均能检测出内毒素。10︰1 LPS/LBP复合物组、15︰1 LPS/LBP复合物组复合物内毒素浓度显著高于5︰1 LPS/LBP复合物组内毒素浓度(P<0.05)。10︰1 LPS/LBP复合物组与15︰1 LPS/LBP复合物组内毒素浓度无统计学差异(P>0.1)。各浓度LBP组均未检出内毒素,各LPS组内毒素检测也为阴性。 结论 LPS︰LBP为10︰1是较为合理的构建LPS/LBP复合物的比例,通过温孵及凝胶电泳可获得纯度较高的LPS/LBP复合物。
- Abstract:
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更新日期/Last Update:
2017-04-28